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醫學細胞分子生物學實驗

包郵 醫學細胞分子生物學實驗

作者:苑輝卿編
出版社:科學出版社出版時間:2013-08-01
開本: 16開 頁數: 232
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醫學細胞分子生物學實驗 版權信息

醫學細胞分子生物學實驗 本書特色

《醫學細胞分子生物學實驗(第2版)》概念準確、文字簡明,層次清晰、使用方便,將醫學細胞生物學實驗、醫學生物化學與分子生物學實驗、醫學遺傳學實驗3個學科的基本知識點融合在一本教材中,既減輕學生的經濟負擔,又便于學生和教師了解相關學科的實驗內容及學科交叉點,有利于提高教學效果,提高綜合素質。全書分為基本實驗、綜合實驗、創新實驗3篇。
《醫學細胞分子生物學實驗(第2版)》適合醫藥院校5年制、長學制學生使用,也可供研究生參考。

醫學細胞分子生物學實驗 內容簡介

實驗教學是醫學教育的重要內容,是培養學生實踐能力和創新精神的創新型人才的重要環節。在這次實驗教學的改革中,我們把細胞生物學、醫學生物化學與分子生物學、遺傳學三個學科的實驗教學融合成了一個醫學細胞分子生物學實驗平臺,編寫了這本涵蓋三個學科的實驗教材。本教材包括三篇,**篇為基本實驗,分為三章,**章是細胞生物學實驗,第二章是醫學生物化學與分子生物實驗,第三章是遺傳學實驗,分別從細胞形態、細胞內生物化學、分子生物學、遺傳學的基本技能角度,培養學生基本的實驗操作能力。此篇雖為培養基本操作技能而設計,但實驗內容已進行相當程度的改進,注重先進性與實用性,緊扣目前該領域的發展趨勢及臨床檢驗的實際操作,使學生能在將來的工作中盡快適應工作需要。

醫學細胞分子生物學實驗 目錄

**篇 基本實驗
**章 醫學細胞生物學基本實驗
**節 細胞的顯微結構
實驗一 細胞的一般形態結構觀察
實驗二 細胞的顯微測量技術
第二節 細胞生理活動
實驗三 胞質環流
實驗四 細胞吞噬
實驗五 細胞活性鑒定
實驗六 細胞融合
第三節 細胞化學成分的顯示
實驗七 普通細胞化學
實驗八 核酸細胞化學
實驗九 酶細胞化學
實驗十 熒光細胞化學與免疫熒光細胞化學
第四節 細胞增殖
實驗十一 無絲分裂
實驗十二 有絲分裂
實驗十三 減數分裂
實驗十四 x染色質標本制備與觀察
實驗十五 早熟染色體凝集(pcc)的誘導和觀察
第五節 細胞培養
實驗十六 原代細胞培養
實驗十七 細胞傳代培養
實驗十八 體外培養細胞的觀察方法
第二章 醫學生物化學基本實驗
**節 蛋白定量分析實驗
實驗一 雙縮脲法測定蛋白質含量
實驗二 folin酚法測定蛋白質含量
實驗三 考馬斯亮藍法測定蛋白質含量
實驗四 紫外分光光度法測定蛋白質含量
第二節 層析分離純化實驗
實驗五 血清γ-球蛋白的分離純化與鑒定
實驗六 葡聚糖凝膠分離血紅蛋白和dnp胰糜蛋白酶混合液
實驗七 離子交換層析分離混合氨基酸
第三節 電泳分析實驗
實驗八 血清蛋白質乙酸纖維素薄膜電泳
實驗九 血漿脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳
實驗十 聚丙烯酰胺凝膠電泳分離血清ldh同工酶
實驗十一 sds-page測定蛋白質相對分子質量
實驗十二 等電聚焦法測定蛋白質等電點
第四節 酶學實驗
實驗十三 ph對酶促反應速度的影響
實驗十四 溫度對酶促反應速度的影響
實驗十五 底物濃度對酶促反應速度的影響——堿性磷酸酶米氏常數的測定
實驗十六 抑制劑對酶促反應速度的影響
實驗十七 酶的提取及比活性測定
第五節 物質代謝實驗
實驗十八 胰島素對血糖含量的影響
實驗十九 鄰甲苯胺法測血糖含量
實驗二十 糖酵解中間產物的鑒定
實驗二十一 血清中谷丙轉氨酶活性的測定
實驗二十二 血清脂類含量分析
第三章 醫學分子生物學基本實驗
**節 分子克隆實驗
實驗一 質粒dna的提取與純化
實驗二 質粒dna濃度和純度的測定
實驗三 dna瓊脂糖凝膠電泳
實驗四 dna的限制性酶切反應
實驗五 目的dna和載體dna酶切片段的回收
實驗六 目的基因與載體的體外連接
實驗七 大腸埃希菌感受態細胞的制備
實驗八 重組子的轉化及陽性克隆的初步篩選
實驗九 陽性重組子的鑒定
第二節 外源基因在原核細胞中的表達
實驗十 外源基因在大腸埃希菌的誘導表達和提取
實驗十一 親和層析法純化重組蛋白
第三節 pcr技術
實驗十二 pcr擴增目的基因
實驗十三 總rna提取及rt-pcr擴增目的基因
實驗十四 實時定量pcr分析真核基因的表達
第四節 蛋白質的表達分析
實驗十五 蛋白質印跡實驗
實驗十六 免疫細胞化學檢測細胞內蛋白表達
實驗十七 外源基因在真核細胞中的表達
第四章 醫學遺傳學基本實驗
**節 細胞遺傳學實驗
實驗一 人類外周血淋巴細胞培養
實驗二 人類外周血淋巴細胞染色體的制備
實驗三 人類染色體g顯帶
實驗四 人類g顯帶染色體核型分析
實驗五 姐妹染色單體交換(sce)標本的制備與觀察
第二節 分子遺傳學實驗
實驗六 短串聯重復序列(str)的多態性分析
實驗七 限制性片段長度多態分析
實驗八 單鏈構象多態性的檢測
第三節 人類遺傳性狀分析
實驗九 遺傳性狀基因型與表型分析
實驗十 遺傳病的家系分析和再發風險估計
第二篇 綜合實驗
**章 細胞增殖活力分析
**節 細胞增殖的定量分析
實驗一 細胞琥珀酸脫氫酶活性檢測(mtt法)
實驗二 細胞周期的檢測
第二節 細胞內atp含量測定
實驗三 人淋巴細胞atp活力檢測
第三節 細胞增殖的染色分析
實驗四 brdu染色法檢測細胞增殖
實驗五 ki-67免疫染色法檢測細胞增殖
第二章 細胞凋亡的誘導與檢測
**節 細胞凋亡的誘導與形態結構觀察
實驗一 培養細胞的凋亡誘導
實驗二 臺盼藍染色檢測凋亡細胞
實驗三 蘇木精-伊紅染色檢測凋亡細胞
實驗四 giemsa染色檢測凋亡細胞
實驗五 吖啶橙熒光染色檢測凋亡細胞
實驗六 ho.33342與pi熒光雙染檢測凋亡細胞
第二節 凋亡細胞的超微結構觀察
實驗七 透射電鏡觀察凋亡細胞
實驗八 掃描電鏡觀察凋亡細胞
第三節 凋亡細胞的定量分析
實驗九 流式細胞術檢測凋亡細胞
第四節 細胞凋亡的分子生物學特征
實驗十 凋亡細胞dna ladder檢測
實驗十一 caspase 3酶活性測定
實驗十二 凋亡相關蛋白表達水平檢測
實驗十三 凋亡相關基因轉錄水平的表達檢測
第三章 細胞的自噬與分析
**節 細胞自噬的形態學分析
實驗一 透射電鏡觀察自噬體的形成
實驗二 gfp-lc3自噬斑點的熒光顯微鏡檢測
第二節 自噬標志蛋白的表達分析
實驗三 蛋白質印跡法檢測自噬標志蛋白的變化
第四章 真核生物基因表達調控分析
實驗一 甲基化特異性pcr檢測基因啟動子甲基化
實驗二 熒光素酶報告基因瞬時轉染分析啟動子活性
第五章 四氯化碳致培養肝細胞損傷的分析
**節 培養肝細胞損傷模型的誘導與形態學分析
實驗一 肝細胞損傷的誘導及常規形態檢查
實驗二 損傷細胞的脂肪變性檢測
第二節 肝細胞損傷的定量分析
實驗三 cck法檢測細胞存活率
第三節 肝損傷細胞相關酶活性的分析
實驗四 肝損傷細胞乳酸脫氫酶活性檢測
實驗五 肝損傷細胞谷丙轉氨酶活性檢測
第四節 肝損傷細胞相關基因的表達分析
實驗六 肝細胞中ppar-γ1表達水平的檢測
第六章 人遺傳性狀基因的分子診斷與應用
實驗一 duchenne型肌營養不良的基因診斷
實驗二 多重rt-pcr檢測染色體易位
實驗三 利用短串聯重復序列進行親權鑒定
第三篇 創新實驗
實驗一 糖尿病的生化及遺傳檢測分析實驗
實驗二 唐氏綜合征的產前診斷方法
實驗三 家族性高膽固醇血癥的診斷方法
實驗四 血友病的診斷
實驗五 重組人促紅細胞生成素在細胞中的表達、分離和純化
實驗六 p53基因與腫瘤相關性實驗設計
實驗七 小鼠組織細胞形態及功能分析
實驗八 小鼠組織特種細胞的形態及特征性成分的鑒定
附錄
附錄一 實驗室規則
附錄二 實驗室安全及防護
附錄三 實驗室常用玻璃儀器的洗滌與清潔
附錄四 生物繪圖的要求與方法
附錄五 生物學實驗設計報告
附錄六 常用實驗技術原理
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