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分子醫學實驗技術

包郵 分子醫學實驗技術

作者:趙魯杭
出版社:浙江大學出版社出版時間:2014-04-01
開本: 16開 頁數: 213
本類榜單:醫學銷量榜
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分子醫學實驗技術 版權信息

分子醫學實驗技術 本書特色

分子醫學是從分子水平上研究醫學問題的一個學科領域,其覆蓋學科門類比較廣泛,主要包括有生物化學,分子生物學,遺傳學,分子免疫學等,趙魯杭、徐立紅主編的《分子醫學實驗技術(全國高等醫藥教育規劃教材)》整合了生物化學、分子生物學、遺傳學和部分免疫學的實驗教學的相關內容,結合分子醫學領域的先進的實驗技術、方法和臨床科學問題,通過實驗強化所學的基礎理論知識,訓練學生的基本實驗技能,培養學生綜合實驗設計的能力和開拓性思維,為培養優秀的醫學研究人才和臨床醫生奠定基礎。

分子醫學實驗技術 內容簡介

該實驗教材的內容基本概括了當今分子醫學領域的主要實驗技術,充分體現了實驗技術的先進性,主要內容包括:各種電泳技術和層析技術、分光光度計技術、離心技術、蛋白質的制備、分離純化技術以及含量和活性的檢測、鑒定等、遺傳病的分子診斷技術、染色體制備技術、蛋白組學的主要研究思路和相關實驗技術。學生的自主創新性實驗等。

分子醫學實驗技術 目錄

**篇 分子醫學實驗技術概論

**章 分子醫學實驗基本要求

 **節 實驗室規章制度與操作規范

  一、實驗室規章制度

  二、實驗注意事項及應急處理

  三、實驗室基本操作技能

 第二節 實驗記錄、數據處理和實驗報告

  一、實驗記錄

  二、實驗數據的處理和實驗誤差

  三、實驗報告

第二章 分子醫學實驗樣品制備的原則、策略和方法

 **節實驗樣品制備的基本原則和策略

  一、實驗樣品制備的基本原則

  二、實驗樣品制備的基本策略

 第二節 常用實驗樣品的制備

  一、血液樣品

  二、組織樣品

  三、微生物樣品

  四、植物樣品

 第三節 生物大分子的制備

  一、生物材料的選擇與預處理

  二、組織細胞的破碎

  三、抽提

  四、生物大分子的分離、純化

  五、純度的分析鑒定

  六、產物的濃縮、干燥

第二篇 分子醫學實驗常用的技術和方法

第三章 離心分離技術

 **節 離心的基本原理和基本概念

  一、離心的基本原理

  二、離心的基本概念

 第二節離心機分類和離心方法

  一、離心機分類

  二、離心方法

 第三節離心機的使用操作

第四章 電泳技術

 **節 基本原理

  一、電泳的基本原理

  二、影響帶電粒子在電場中泳動的因素

 第二節 電泳技術的分類

 第三節電 泳裝置

 第四節 電泳結果的檢測、分析和回收

  一、電泳示蹤劑

  二、電泳染色劑

  三、電泳結果的檢測及回收

 第五節 幾種常用的電泳方法

  一、聚丙烯酰胺凝膠電泳

  二、sds一聚丙烯酰胺凝膠電泳

  三、等電聚焦電泳

  四、聚丙烯酰胺凝膠雙向電泳

  五、蛋白印跡

  六、dna印跡和rna印跡

第五章 層析技術

 **節 基本原理和概念

  一、層析的基本原理

  二、層析技術的基本概念

 第二節 層析技術的分類

  一、層析的分類

  二、層析洗脫與檢測方法

 第三節 吸附層析

  一、吸附層析的原理

  二、吸附層析的分類

  三、固定相和流動相的選擇

  四、薄層層析的制板、點樣、展層和顯色

 第四節 分配層析

  一、分配層析的原理

  二、紙層析

 第五節 離子交換層析

  一、離子交換層析的原理

  二、離子交換劑的類型

  三、離子交換劑的選擇與應用

  四、離子交換劑的處理、再生和保存

  五、離子交換層析的操作

 第六節 凝膠層析

  一、凝膠層析的基本原理

  二、凝膠的種類和性質

  三、柱層析凝膠的選擇

  四、凝膠的處理、保存和凝膠層析的操作

 第七節 親和層析

  一、親和層析的基本原理

  二、親和層析載體、配體的選擇和偶聯

  三、親和層析的操作

 第八節 高效液相層析

  一、高效液相層析的原理

  二、hplc的操作及注意事項

第六章 分光光度技術

 **節分光光度技術原理

  一、基本原理

  二、lambert-beer定律

  三、分光光度技術的定量方法

 第二節分光光度計的基本結構及使用

  一、分光光度計的基本結構

  二、幾種常用分光光度計

第七章pcr技術

 **節pcr的原理及影響因素

  一、pcr的原理

  二、pcr的反應體系及主要影響因素

 第二節pcr技術的應用

  一、逆轉錄pcr

  二、單鏈構象多態性pcr

  三、限制性片段長度多態性pcr

  四、等位基因特異擴增法

第三篇實驗項目

第八章 蛋白質與酶學實驗項目

 **節概述

  一、蛋白質的分子組成、結構及理化性質

  二、蛋白質的分離和純化

  三、蛋白質的定量

  四、蛋白質純度的鑒定

  五、蛋白質生物活性的測定

 第二節實驗項目

  實驗一 生物樣本中蛋白質的提取

  實驗1-1組織細胞中蛋白質的提取

  實驗1-2細菌細胞中蛋白質的提取

  實驗二 蛋白質含量的測定

  實驗2-lkjeldahl定氮法測定蛋白質的濃度

  實驗2-2folin一酚試劑法(iowry法)測定蛋白質的濃度

  實驗2-3考馬斯亮藍法測定蛋白質的濃度

  實驗2-4紫外吸收法測定蛋白質的濃度

  實驗2-5bca法測定蛋白質的濃度

  實驗三 蛋白質的電泳分離

  實驗3-l聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質

  實驗3-2sds—page測定蛋白質相對分子質量

  實驗四 蛋白質印跡技術

  實驗五 等電聚焦電泳法測定蛋白質等電點

  實驗六 層析技術(凝膠過濾、離子交換、親和層析、hplc)

  實驗6-1凝膠層析法分離血紅蛋白和dnp一魚精蛋白

  實驗6-2分子篩層析測定蛋白質相對分子質量

  實驗6-3離子交換層析分離混合氨基酸

  實驗6-4薄層層析分離脂類

  實驗6-5紙層析法驗證轉氨基作用

  實驗6-6高效液相層析分離蛋白質

  實驗6-7親和層析純化植物凝集素及凝集素活性鑒定

  實驗七 底物濃度對酶促反應速度的影響——酸性磷酸酶k及v值測定

第九章 流式細胞技術

 **節概述

  一、流式細胞術的基本原理

  二、流式細胞術的應用

  三、流式細胞儀操作規程

 第二節 實驗項目

  實驗八 用質控血檢測t淋巴細胞亞群

  實驗九 細胞凋亡的流式實驗測定

第十章 核酸和染色體實驗

 **節 概述

  一、核酸的分子組成與結構

  二、核酸的理化性質

  三、核酸的制備和含量測定

 第二節 實驗項目

  實驗十dna的提取

  實驗10-1真核生物組織細胞基因組dna的提取

  實驗10-2真核生物血液標本中dna的提取

  實驗10-3質粒dna的提取

  實驗十一dna含量和純度的i貝0定

  實驗11-1二苯胺顯色法測定dna含量

  實驗11-2紫外吸收法測定基因組dna的含量及純度

  實驗十二rna的制備

  實驗12-1一步法提取rna

  實驗12-2trizol reagent一步法提取rna

  實驗十三地衣酚法測定rna含量

  實驗十四 逆轉錄一聚合酶鏈反應(rt—pcr)

  實驗14-1一步法rt—pcr

  實驗14-2兩步法rt—pcr

  實驗十五 電泳法分離rna和dna

  實驗15-1瓊脂糖凝膠電泳分離dna

  實驗15-2聚丙烯酰胺凝膠電泳(page)分離rna

  實驗十六 人類外周血染色體標本制備

  實驗十七 人類染色體g帶標本制備及觀察

  實驗十八 人類染色體核型分析

  實驗十九 遺傳病基因突變檢測分析

  實驗19-1duchenne型肌營養不良癥dmd基因檢測

  實驗19-2遺傳病基因突變分析

  實驗二十 基因多態性的檢測

  實驗20-1pcr-rflp法測定cyp2c19m1等位基因

  實驗20-2等位基因特異擴增法分析基因中單堿基突變

第十一章物質代謝與激素調節

 **節 概述

  一、物質代謝的概念

  二、物質代謝研究的材料與方法

 第二節 實驗項目

  實驗二十一 胰島素及腎上腺素對血糖濃度的影響

  實驗二十二nelson—somogyi法測定血糖濃度

  實驗二十三 飽食、饑餓及激素對肝糖原含量的影響

  實驗二十四 血清谷丙轉氨酶活性的測定(賴氏法)

第十二章 自主創新性實驗

 **節概述

  一、自主創新性實驗的分類

  二、自主創新性實驗項目設計需要考慮或注意的問題

 第二節 自主創新性實驗設計

  一、基本程序

  二、實驗設計的基本思路

附錄

 一、常用數據表

  表1調整硫酸銨溶液飽和度計算表(25℃)

  表2蛋白質等電點參考值

  表3常見蛋白質相對分子質量參考值

  表4核酸、蛋白質換算數據

  表5sds-page分離膠配方表

 二、常用試劑的配制

 三、緩沖溶液及配制

 四、透析袋的處理與保存

參考文獻

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